Azot je plin koji se široko koristi u proizvodnji, zajedno s desetak drugih inertnih jedinjenja. Nije uvijek poželjno transportirati ili skladištiti ovaj plin u čistom obliku, a ponekad jednostavno trebate utvrditi njegovo prisustvo u supstanci. Za to se koristi Kjeldahlova metoda. Kjeldahlova metoda sastoji se u činjenici da se dušik, koji se nalazi u filtriranoj tečnosti bez proteina, pretvara u amonijum tokom reakcije sagorevanja sumpornom kiselinom. Dobiveni amonijak se slobodno oslobađa nakon alkalne reakcije.
Instrukcije
Korak 1
Za analizu uzmite 4 ml krvi, plazme ili seruma, razrijedite je sa 8 ml destilirane vode. U istu tikvicu dodajte 8 ml triklorooctene kiseline. Otopinu dobro promiješajte i filtrirajte.
Korak 2
U destilacijsku tikvicu ulijte 5 ml filtrirane tečnosti koja će podrazumevano sadržavati 1 ml analizirane krvi. Tamo dodajte 1 ml reagensa br. 2, tikvicu zagrijavajte na laganom plamenu dok se ne pojavi bijela para.
Korak 3
Postavite tikvicu na takav način da joj dno samo malo dodiruje plamen. Proces sagorijevanja smatra se završenim kada tečnost postane plavkasta ili bezbojna.
Korak 4
Stavite tikvicu sa strane da se ohladi. Dovoljno jednu i po do dve minute. Inače nastaje netopivi talog.
Korak 5
Sipajte vodu niz zid, ispirajući njime lijevak. Mućkajte dok se ne pomiješa, po potrebi zagrijavajući tikvicu.
Korak 6
Sastavite uređaj, povežite prijemnik. Stavite 10 ml 0,01 N. u prijemnik. otopina sumporne kiseline. Dodajte jednu ili dve kapi metilrota. Nakon kombiniranja svih sastojaka, pričvrstite pumpu za mlaz vode na prijemnik.
Korak 7
Počnite propuštati zrak kroz pripravak, ulijte 33% natrijum hidroksida u dio za destilaciju, dok tečnost ne pređe iz bezbojne u tamnoplavu ili tamno smeđu. To ukazuje na alkalnu reakciju.
Korak 8
Zaustavite destilaciju nakon deset minuta. Zatvorite slavinu pumpe za mlaz vode, otvorite čep prijemnika, isperite sumpornu kiselinu s kraja rashladne cijevi. Zamenite drugim prijemnikom sa istom jačinom od 0,01 N. otopine sumporne kiseline, izvršite drugu destilaciju.
Korak 9
Dodajte kaustičnu sodu u prvi prijemnik dok se 30 sekundi ne dobije stabilna žuta boja.
Korak 10
Zaključak: 1 ml 0,01 N. sumporna kiselina ili natrijum hidroksid odgovara 0,14 mg azota.
Razlika između količine sumporne kiseline smeštene u prijemnik i količine natrijum hidroksida uzete tokom titracije, proizvedene u 0,14 mg, jednaka je količini zaostalog azota u testnom 1 ml krvi. Da bi se prikazala količina dušika u miligramima posto, rezultat se mora pomnožiti sa 100.
